Генетическая экспертиза по установлению близкого родства (дядя/тетя, бабушка/дедушка, племянник/племянница, внук/внучка)

В каких случаях необходимо проведение генетической экспертизы по установлению близкого родства (дядя/тетя, бабушка/дедушка, племянник/племянница, внук/внучка)?

• при необходимости определения истинного отцовства/материнства детей, когда невозможно получить образцы для исследования у предполагаемых родителей;
• для определения родства с целью получения наследства или отказа от него;
• для определения родства с целью иммиграции в другую страну при наличии родственных связей.

Наиболее часто при генетической экспертизе по установлению близкого родства у предполагаемых родственников берутся образцы буккального эпителия (соскоб ватной палочкой с внутренней стороны щеки), кровь из пальца в объеме 0,3-0,5 мл, кровь на ватных дисках, волосы с фолликулами ("луковицами"), ногти, слюна или сперма. В тех случаях, когда по каким-либо причинам не удается получить данные материалы, используют другие объекты биологического происхождения.

Взятие образцов тканей для установления родства по требованию суда осуществляется в присутствии свидетелей согласно следующим законам:

• ст. 35 Федерального закона от 31 мая 2001 г. № 73-ФЗ "О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации";
• п. 84.4 "Порядок организации и производства судебно-медицинских экспертиз в государственных судебно-экспертных учреждениях Российской Федерации" (Приказ Минздравсоцразвития РФ № 346н от 12.05.2010 г.).

Взятие образцов для установления близкого родства в частном порядке (не для предоставления в суд) осуществляется заказчиками либо самостоятельно, либо в лаборатории.

Исследование осуществляется в три этапа:

• Выделение ДНК из биологического материала. Процесс выделения ДНК из клеток является очень важным этапом для дальнейшего исследования. Поэтому в большинстве случаев для этих целей используются коммерческие наборы реактивов ведущих зарубежных фирм-производителей, таких как Applied Biosystems (США), Promega (США), QIAGEN (Германия);
• Увеличение количества исследуемых локусов ДНК для дальнейшего анализа методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР);
• Анализ полиморфизмов длин фрагментов, полученных после ПЦР (выявление коротких тандемных повторов), с помощью капиллярного электрофореза и/или определение первичной последовательности нуклеотидов амплифицированных локусов (выявление однонуклеотидных полиморфизмов) методом секвенирования.

Поскольку точность экспертизы зависит от степени родства, количества родственников, принимающих участие в исследовании, и количества анализируемых маркеров, для получения более достоверных результатов анализа рекомендуем тестировать более двух лиц, предположительно находящихся в родстве. Например, в результате экспертизы по установлению близкого родства "внук-бабушка" положительное заключение имеет вероятность более 90%, отрицательное – около 85%, в то время как при установлении родства "внук-бабушка-дедушка" вероятность положительного заключения возрастает до 99%, вероятность отрицательного – до 100%.

Генетическими маркерами, исследуемыми в ходе генетической экспертизы по установлению близкого родства, могут выступать:

• аутосомные локусы. Аутосомы - это парные хромосомы, одинаковые у мужского и женского организма. Иными словами, это все хромосомы, кроме половых (X- и Y-хромосом). Генетические маркеры, расположенные на аутосомах (аутосомные локусы), наиболее часто используются в генетической экспертизе по установлению близкого родства. Для этих целей ведущие зарубежные фирмы-производители биотехнологической продукции разработали коммерческие наборы реактивов;
• STR-локусы Y-хромосомы. Y-хромосома – это половая хромосома, определяющая мужской пол организма. Y-хромосома - непарная хромосома, поэтому в мейозе не рекомбинирует и, следовательно, передается по наследству от отца сыну в практически неизменном виде. Y-chromosome Haplotype Reference Database рекомендует использовать 22 полиморфных локуса. Анализу ДНК Y-хромосомы посвящена наша статья «Генетическая экспертиза Y-хромосомы (тест семейной принадлежности)»;
• STR-локусы X-хромосомы. X-хромосома - это половая хромосома, определяющая женский пол организма. В женских клетках находятся две X-хромосомы, в то время как в мужских - только одна. Поэтому в мужских клетках X-хромосома практически не рекомбинирует и передается детям в практически неизменном виде. Компания QIAGEN выпускает набор Investigator Argus X-12 Kit для картирования локусов, распологающихся на Х-хромосоме;
• нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК (мтДНК). Анализу мтДНК посвящена наша статья «Генетическая экспертиза митохондриальной ДНК (мтДНК)».

В ходе генетической экспертизы по установлению близкого родства анализируются те локусы ДНК, которые по мужской или женской линии передались по наследству от предполагаемого родственника. Установление родства по отцовской линии проводится с использованием либо аутосомных локусов, либо локусов, находящихся на Y-хромосоме. Типирование по локусам Y- и Х-хромосом используется при установлении родственных связей по отцовской линии: например, по Y-хромосоме определяют родство "дед по отцу - внук", "дядя по отцу – племянник", "братья по отцу", а по Х-хромосоме устанавливают родство "бабка по отцу – внучка", "тетя по отцу – племянница", "сестра по отцу". Установление родства по материнской линии проводится с использованием аутосомных локусов либо путем исследования нуклеотидного профиля митохондриальной ДНК.

Рассмотрим по порядку все возможные варианты родственных связей.

Пример № 1. Установление родства "дедушка/бабушка по отцу – внук/внучка".

Для выполнения экспертизы требуются пробы биологического материала предполагаемой бабушки/предполагаемого дедушки, матери, сына/дочери.

Задача: установить родство дедушки/бабушки по отцу относительно сына/дочери.

Система генетических маркеров: аутосомные маркеры, локусы Y- и Х-хромосом.

Генотип сына (дочери) по одному маркеру – DW, генотип матери – SW, предполагаемой бабушки – PR, предполагаемого дедушки – DA. Известно, что рассматриваемые дети являются родными детьми матери. Это означает, что аллель W, присутствующая как у матери, так и у ребенка, унаследована ребенком от матери. Аллель D передана ребенку от биологического отца и, следовательно, должна быть в генотипе его родителей. Генотип предполагаемого деда включает аллель D, что указывает на биологическое родство деда и ребенка.

Пример № 2. Установление родства "дедушка/бабушка по матери – внук/внучка"

Для выполнения экспертизы требуются пробы биологического материала предполагаемой бабушки/предполагаемого дедушки, сына/дочери.

Задача: установить родство дедушки/бабушки по материнской линии относительно сына/дочери.

Система генетических маркеров: аутосомные маркеры, нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК.

Генотип сына (дочери) по одному маркеру – DW, генотип отца – SW, предполагаемой бабушки – PR, предполагаемого дедушки – DA. Известно, что рассматриваемые дети являются родными детьми своего отца. Это означает, что аллель W, присутствующая как у отца, так и у ребенка, передана ребенку от отца. Аллель D унаследована ребенком от биологической матери и, следовательно, должна присутствовать в генотипе одного из его родителей. Генотип предполагаемого деда включает аллель D, что указывает на биологическое родство дедушки по материнской линии и ребенка.

Пример № 3. Установление родства "тетя/дядя по матери – племянник/племянница"

Для выполнения экспертизы необходимы образцы биологического материала предполагаемой тети/предполагаемого дяди, отца, матери, племянника/племянницы.

Цель: установить родство тети/дяди по материнской линии относительно племянника/племянницы.

Система генетических маркеров: аутосомные маркеры, нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК.

Генотип ребенка (сына или дочери) по одному маркеру – DW, генотип предполагаемой тети – PA, генотип предполагаемого дяди - PD, генотип биологической матери – DR, генотип биологического отца - SW. Известно, что рассматриваемые дети являются родными детьми своих отца и матери. Это означает, что аллель W, присутствующая как у отца, так и у ребенка, передана ребенку от отца, а аллель D унаследована ребенком от матери. Аллель D должна присутствовать в генотипе одного из ее родителей (бабушки или дедушки), а также может быть обнаружена в генотипах братьев и сестер (предполагаемой тети и предполагаемого дяди). В данном случае аллель D обнаружена в генотипе предполагаемого дяди. Анализ этой аллели свидетельствует о биологическом родстве дяди по материнской линии и племянника/племянницы. Анализ большого числа локусов дает возможность точно определить, является ли предполагаемый дядя или предполагаемая тетя родственником.

Другим, более достоверным методом установления родства по материнской линии является анализ нуклеотидного профиля митохондриальной ДНК. У всех родственников данный профиль будет одинаковым.

Пример № 4. Установление родства "тетя/дядя по отцу – племянник/племянница"

Для выполнения процедуры необходимы пробные образцы биологического материала предполагаемой тети/предполагаемого дяди, отца, матери, племянника/племянницы.

Цель: определить родство тети/дяди по линии отца относительно племянника/племянницы.

Система генетических маркеров: аутосомные маркеры, локусы Y- и Х-хромосом.

Y-хромосома присутствует только у мужчин и передается исключительно от отца к сыну. Следовательно, при анализе генетических маркеров, находящихся на Y-хромосоме в образцах предполагаемого дяди и племянника, проверяется степень их схожести.

Нормативно-правовая база для проведения генетической кспертизы по установлению близкого родства

• Федеральный закон от 31 мая 2001 года № 73-ФЗ "О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации";
• Приказ Минздравсоцразвития РФ № 346н от 12 мая 2010 года "Об утверждении Порядка организации и проведения судебно-медицинских экспертиз";
• Методические указания Минздрава РФ № 98/253 от 19 января 1999 года "Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства";
• Методические указания Минздрава РФ № 2001/4 от 25 января 2001 года "Применение молекулярно-генетической индивидуализирующей системы на основе полиморфизма нуклеотидных последовательностей митохондриальной ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления биологического родства";
• Семейный кодекс РФ. Глава 10 "Установление происхождения детей".